3D細胞培養(yǎng)是一種在體外模擬體內(nèi)環(huán)境的實驗技術,它允許細胞在三維空間中生長和相互作用,從而更接近于其在體內(nèi)的自然狀態(tài)。這種技術對于研究細胞行為、組織發(fā)育、疾病機制以及藥物篩選等方面具有重要意義。在進行3D細胞培養(yǎng)時,需要使用一系列專門的耗材和設備。
一、 培養(yǎng)容器類
- 3D細胞培養(yǎng)板:如NEST系列的 96孔板和384孔板,其獨特的聚合物涂層可支持癌癥和干細胞研究等,能促進球狀體和類器官的快速形成,且具有高可重復性、穩(wěn)定性等優(yōu)點,孔底為圓形,透明度高,材質(zhì)一般為聚苯乙烯,使用方便,數(shù)據(jù)可靠.
- 培養(yǎng)皿:不同規(guī)格的培養(yǎng)皿常用于細胞的常規(guī)培養(yǎng)和一些特殊培養(yǎng)需求,如60mm、100mm等常見規(guī)格,材質(zhì)有塑料和玻璃兩種,玻璃培養(yǎng)皿可重復使用,但需清洗和滅菌,塑料培養(yǎng)皿則為一次性使用,更加方便.
- 細胞培養(yǎng)瓶:有多種規(guī)格,如25cm2、75cm2、175cm2等,適用于不同數(shù)量細胞的培養(yǎng),其瓶蓋有密封蓋和透氣蓋之分,透氣蓋可保證細胞培養(yǎng)過程中氣體交換.
二、 基質(zhì)材料類
- 微載體:常見的有片狀微載體等,為細胞提供附著生長的基質(zhì),可增大細胞培養(yǎng)的表面積,提高細胞密度,促進細胞間的相互作用,模擬體內(nèi)的三維生長環(huán)境,有利于細胞的生長、分化和功能表達 。
- 支架材料:包括天然高分子材料如膠原蛋白、殼聚糖等,以及合成高分子材料如聚乳酸、聚己內(nèi)酯等,這些材料可制成三維多孔結構的支架,細胞能夠在支架內(nèi)部生長和增殖,形成類似組織的結構。
三、 細胞處理試劑類
- 胰蛋白酶:用于細胞的消化和傳代,使細胞從培養(yǎng)容器表面脫離形成單細胞懸液,但使用時需注意濃度、溫度和消化時間,以免對細胞造成損傷.
- 細胞解離液:非酶性的細胞解離液可在不損傷細胞表面蛋白的情況下使細胞分離,適用于一些對胰蛋白酶敏感的細胞類型.
- 胎牛血清:含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)、生長因子和激素等,能為細胞提供全面的營養(yǎng)支持,促進細胞生長和增殖,但需注意血清的質(zhì)量和批次間的差異.
- 抗生素:如青霉素、鏈霉素等,用于預防和控制細胞培養(yǎng)過程中的細菌污染,一般在細胞培養(yǎng)初期或細胞較為脆弱時添加.
- 抗真菌藥物:如兩性霉素B等,可防止細胞培養(yǎng)中真菌的污染,尤其是在使用血清等易受真菌污染的試劑時需添加.
-培養(yǎng)基和培養(yǎng)液是3D細胞培養(yǎng)的基礎,它們提供了細胞生長所需的營養(yǎng)和環(huán)境。常用的培養(yǎng)基包括DMEM、RPMI 1640、MEM等,通常還會添加胎牛血清、人血清、抗生素和生長因子等成分以優(yōu)化培養(yǎng)條件。
四、 檢測試劑類
- 細胞增殖試劑:如MTT試劑、CCK-8試劑等,可通過檢測細胞的代謝活性來反映細胞的增殖能力,操作簡便,適用于大規(guī)模的細胞增殖檢測.
- 細胞凋亡檢測試劑盒:包括Annexin V-FITC/PI雙染試劑盒等,可用于檢測細胞凋亡的程度和比例,對于研究細胞的生長調(diào)控和藥物作用機制具有重要意義.
- 實時細胞分析儀配套試劑:若使用實時細胞分析儀來監(jiān)測細胞的增殖、遷移和侵襲等動態(tài)過程,則需要相應的試劑,如特定的熒光染料或標記物等.
五、 其他常用耗材
- 移液器和吸頭:不同規(guī)格的移液器(如1ml、5ml、10ml等)和與之匹配的吸頭是細胞培養(yǎng)中必不可少的工具,用于精確地吸取和分配培養(yǎng)基、細胞懸液等液體.
- 離心管:15ml和50ml的離心管常用于細胞的離心收集和分離,其材質(zhì)一般為塑料,具有良好的耐腐蝕性和密封性.
- 細胞凍存管:用于保存凍存細胞,一般為塑料材質(zhì),有不同規(guī)格可供選擇,凍存管需耐受低溫且密封性好,以保證細胞在液氮中長時間保存的活性.
- 無菌手套、口罩、帽子等:在細胞培養(yǎng)操作過程中,需佩戴無菌手套、口罩和帽子等,以防止操作人員對細胞培養(yǎng)環(huán)境和細胞造成污染.
- 培養(yǎng)箱:細胞培養(yǎng)需要在特定的溫度、濕度和氣體環(huán)境下進行,常見的有二氧化碳培養(yǎng)箱,可精確控制二氧化碳濃度、溫度和濕度,為細胞生長提供穩(wěn)定的環(huán)境.
- 顯微鏡:倒置顯微鏡是細胞培養(yǎng)中常用的觀察工具,可用于觀察細胞的形態(tài)、生長狀態(tài)和細胞密度等,幫助判斷細胞培養(yǎng)的情況.
- 細胞計數(shù)儀:用于準確地計數(shù)細胞數(shù)量,確定細胞接種密度和細胞生長曲線等,提高實驗的準確性和可重復性.
蘇州阿爾法生物提供3D細胞培養(yǎng)耗材、實驗耗材、實驗試劑、實驗室設備等,在進行3D細胞培養(yǎng)時,需根據(jù)具體的細胞類型、培養(yǎng)目的和實驗要求,合理選擇和使用上述試劑耗材,以確保細胞培養(yǎng)的成功和實驗結果的可靠性 。
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