PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)以其高靈敏度和快速檢測能力廣泛應(yīng)用于科研和臨床領(lǐng)域。然而，PCR實(shí)驗(yàn)對污染極為敏感，即使微量的污染也可能導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。據(jù)統(tǒng)計，臨床實(shí)驗(yàn)室中因污染引發(fā)的假陽性率高達(dá) 15%。因此，有效防控污染成為提升PCR實(shí)驗(yàn)成功率的關(guān)鍵。

一、PCR污染的常見原因

1.PCR產(chǎn)物污染

PCR產(chǎn)物具有極高的拷貝量，少量污染即可成為實(shí)驗(yàn)室的主要污染源，導(dǎo)致假陽性結(jié)果。

試劑污染

試劑在制備或存儲過程中可能受到污染，例如移液器、離心管或雙蒸水被核酸模板污染。

樣本交叉污染

樣本容器密封不嚴(yán)或操作不當(dāng)，可能導(dǎo)致樣本間核酸交叉污染。

氣溶膠污染

打開反應(yīng)管蓋子或反復(fù)抽吸樣品時產(chǎn)生的氣溶膠，可能攜帶污染物擴(kuò)散至實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。

環(huán)境交叉污染

實(shí)驗(yàn)室布局不合理、空氣流通不暢或設(shè)備清潔不到位，均可能增加污染風(fēng)險。

二、PCR污染 解決方案：5大招杜絕 PCR污染

1. 分區(qū)操作：建立無交叉污染的工作流程

試劑準(zhǔn)備區(qū)：配置PCR試劑，避免核酸模板進(jìn)入。

樣本處理區(qū)：提取核酸，避免試劑污染。

擴(kuò)增檢測區(qū)：進(jìn)行PCR擴(kuò)增和產(chǎn)物分析，確保單向流動，防止污染擴(kuò)散。

2. 耗材管理：一次性耗材+規(guī)范操作

使用一次性槍頭、離心管和手套，減少重復(fù)使用導(dǎo)致的污染。

定期更換耗材，避免長期使用同一批耗材積累污染物。

3. 環(huán)境消毒：全方位防護(hù)污染源

使用紫外線燈或化學(xué)試劑（如DNA酶）對實(shí)驗(yàn)臺面、空氣進(jìn)行消毒。

空氣沉降法驗(yàn)證消毒效果，確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境清潔。

4. 試劑質(zhì)控：選擇高質(zhì)量PCR試劑

選擇經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制的PCR試劑盒，避免試劑中混入真菌DNA等雜質(zhì)。

實(shí)驗(yàn)前對試劑進(jìn)行預(yù)處理，如使用雙鏈特異性DNA酶去除污染物。

5. 優(yōu)化程序：提高擴(kuò)增特異性

Touch-down PCR：通過逐步降低退火溫度，優(yōu)先擴(kuò)增特異性最高的模板。

熱啟動PCR：在高溫條件下啟動反應(yīng)，避免引物非特異性結(jié)合。

 蘇州阿爾法生物提供的PCR儀采用立體膜加熱技術(shù)，確保溫控精度高達(dá)±0.1℃，有效避免溫度波動引起的非特異性擴(kuò)增。同時，其無油熱蓋設(shè)計防止反應(yīng)液蒸發(fā)，降低氣溶膠污染風(fēng)險。  此外，設(shè)備配備的實(shí)時熒光檢測功能，可實(shí)時監(jiān)測擴(kuò)增過程，及時發(fā)現(xiàn)異常情況，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

PCR實(shí)驗(yàn)污染防控是一項(xiàng)系統(tǒng)工程，需要從分區(qū)操作、耗材管理、環(huán)境消毒、試劑質(zhì)控和程序優(yōu)化等多方面入手。通過科學(xué)規(guī)范的操作和高質(zhì)量設(shè)備的支持，可以有效減少非特異性擴(kuò)增，提升實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和效率。蘇州阿爾法生物提供的朗基PCR儀為實(shí)驗(yàn)室提供了強(qiáng)有力的支持，助力科研研究取得成功。

蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室。公司管理團(tuán)隊(duì)專注于科學(xué)儀器行業(yè)十四年，擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與完善的售后服務(wù)體系，目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)，涵蓋各大高校、檢測中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個群體。提供的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱，恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀，瑞寧移液器，生物反應(yīng)器，發(fā)酵罐，超低溫冰箱，液氮罐，高壓滅菌器，超純水機(jī)，天平，離心機(jī)，離心濃縮儀、研磨機(jī)、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂楓，搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)的80個余廠家。