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蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司

16年專注生物實驗室儀器設(shè)備&耗材綜合供應(yīng)

0512-6295610418934597460

阿爾法構(gòu)建全服務(wù)鏈體系 尊享高于原廠服務(wù)的價值
PCR 實驗優(yōu)化實戰(zhàn):從引物設(shè)計到添加劑應(yīng)用
信息摘要:
PCR 實驗優(yōu)化實戰(zhàn):基于 LAMP 與常規(guī) PCR 的對比研究。本文通過實驗數(shù)據(jù)對比,解析不同技術(shù)路線的特異性差異,提供引物設(shè)計與反應(yīng)體系…

標題:PCR 實驗優(yōu)化實戰(zhàn):基于 LAMP 與常規(guī) PCR 的對比研究


摘要:本文通過實驗數(shù)據(jù)對比,解析不同技術(shù)路線的特異性差異,提供引物設(shè)計與反應(yīng)體系優(yōu)化方案。

 在 LAMP 反應(yīng)中,非特異性擴增發(fā)生率高達 28%(《Biosensors & Bioelectronics》2023),主要源于低溫退火(55-65℃)引發(fā)的引物二聚體。相比之下,常規(guī) PCR 通過以下策略提升特異性:

引物設(shè)計黃金法則

  • Tm 值:58-62℃(相差≤2℃)
  • GC 含量:40-60%
  • 3' 端避免連續(xù) G/C(≤3 個)
  • 產(chǎn)物長度:100-300bp(利于電泳分離)

反應(yīng)體系優(yōu)化

添加物 作用機制 推薦濃度
TMAC 降低 AT 序列 Tm 值,減少錯配 10-20mM
DMSO 破壞 DNA 二級結(jié)構(gòu),提升擴增效率 5-10% v/v
BSA 保護酶活性,減少抑制劑干擾 0.1-0.5mg/mL

實驗驗證
某科研團隊在檢測 EGFR 突變時,通過添加 5% DMSO 并優(yōu)化引物,使非特異性條帶減少 70%,擴增效率提升 2 倍。

PCR儀反應(yīng)步驟



蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司成立于2008年,位于蘇州園區(qū)生物納米園(Biobay)A5幢301室。公司管理團隊專注于科學(xué)儀器行業(yè)十四年,擁有專業(yè)的技術(shù)團隊與完善的售后服務(wù)體系,目前已為300余家實驗室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù),涵蓋各大高校、檢測中心、科研機構(gòu)、制藥企業(yè)等13個群體。提供的實驗室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱,恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀,瑞寧移液器,生物反應(yīng)器,發(fā)酵罐,超低溫冰箱,液氮罐,高壓滅菌器,超純水機,天平,離心機,離心濃縮儀、研磨機、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱,梅特勒,樂楓,搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)的80個余廠家。

四張拼圖

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