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淺談 HEK293 細(xì)胞

作者: Alpha 編輯: 蘇州阿爾法生物 來源: 網(wǎng)絡(luò) 發(fā)布日期: 2021.11.29
信息摘要:
如果您完全熟悉細(xì)胞培養(yǎng),您可能聽說過 HEK293 細(xì)胞。HEK293 細(xì)胞新藥實(shí)驗(yàn)室中 較為常用的細(xì)胞系之一。但它們是什么?為什么要使用它…

如果您完全熟悉細(xì)胞培養(yǎng),您可能聽說過 HEK293 細(xì)胞。HEK293 細(xì)胞新藥實(shí)驗(yàn)室中 較為常用的細(xì)胞系之一。但它們是什么?為什么要使用它們?“293” 是什么意思?與HEK293T 細(xì)胞相同嗎?請(qǐng)繼續(xù)閱讀這些問題的答案以及更多內(nèi)容。

一、什么是 HEK293 細(xì)胞?

HEK293 細(xì)胞是人類胚胎腎細(xì)胞,起初由荷蘭生物學(xué)家 Alex Van der Eb 在 1970 年代初期分離和培養(yǎng)。Van der Eb 實(shí)驗(yàn)室的博士后 Frank Graham 用剪切的腺病毒 5 (Ad5) DNA 進(jìn)行轉(zhuǎn)染 。這是他們的第 293 次實(shí)驗(yàn),所以就命名該細(xì)胞系為 HEK293 ,蓋細(xì)胞系的主要作用是通過細(xì)胞的基因改造實(shí)現(xiàn)重組蛋白合成。那么,HEK293T 細(xì)胞與HEK293是同一種細(xì)胞嗎?

其實(shí),并不完全是,因?yàn)橄礖EK293T細(xì)胞的來源是將 SV40 大 T 抗原整合到 HEK293 基因組中——這意味著它們能夠從攜帶 SV40 復(fù)制起點(diǎn)的質(zhì)粒載體中產(chǎn)生大量蛋白質(zhì)。 

HEK293t

二、HEK 細(xì)胞有何優(yōu)點(diǎn)?

使用 HEK293 細(xì)胞有很多優(yōu)點(diǎn)。它們是一種耐寒、半貼壁、低維護(hù)的細(xì)胞系,分裂迅速,大約每 36 小時(shí)可以增長 1倍。培養(yǎng)的細(xì)胞既能用于瞬時(shí)和穩(wěn)定表達(dá),也可懸浮培養(yǎng)或作為單層培養(yǎng),比較容易轉(zhuǎn)染,并且能夠產(chǎn)生大量的 重組蛋白。

目前,HEK293 細(xì)胞主要用于癌癥研究、新藥開發(fā)、抗體蛋白生產(chǎn)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和蛋白質(zhì)相互作用研究等領(lǐng)域。

三、 HEK293 細(xì)胞的分類

HEK293 細(xì)胞已被用于創(chuàng)建具有特定用途的各種衍生細(xì)胞系。

表 1:HEK293 細(xì)胞的一些常用衍生物。

衍生物

特征

293-F

快速成長;懸浮生長;在無血清培養(yǎng)基中生長

293-H

快速成長;懸浮生長;在無血清培養(yǎng)基中生長;在斑塊檢測中具有良好的依從性

293T

高轉(zhuǎn)染性;包含 SV40 T 抗原

293

293-F 細(xì)胞系的衍生物;快速增長;包含 SV40 T 抗原

293E或239-EBNA1

表達(dá) EBNA-1 蛋白

四、HEK293的生長條件

HEK293 細(xì)胞生長對(duì)培養(yǎng)環(huán)境要求不高。一般情況下維持 37°C 和 5% CO 2的加濕培養(yǎng)箱及充足的培養(yǎng)基供應(yīng)即可滿足 ,為防止細(xì)菌感染,必要時(shí)可添加少許抗生素,比如:青霉素-鏈霉素-谷氨酰胺等。細(xì)胞轉(zhuǎn)染方式可以建議使用HEK293 轉(zhuǎn)染試劑盒,操作方便、簡單。

HEK293細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒

五、HEK293 細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1.HEK293在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí),長期培養(yǎng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞活力下降,所以培養(yǎng)代數(shù)不宜過多,通常培養(yǎng)的代數(shù)維持在13代以下,如果選擇的細(xì)胞系超過20代,需要需要解凍新的細(xì)胞重新開始。

2.實(shí)驗(yàn)操作過程中需要注意無菌操作,避免支原體感染,同時(shí)做好定時(shí)檢測。

3.由于HEK293 細(xì)胞系的衍生物較多,所以培養(yǎng)時(shí)需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)。


蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司13年專注于生物實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備與耗材的供應(yīng),儀器設(shè)備涵蓋生物反應(yīng)器、發(fā)酵罐、細(xì)胞搖床、PCR儀、移液器、離心機(jī)等上百種品類試劑耗材包括:培養(yǎng)瓶、搖瓶、培養(yǎng)基、 HEK293細(xì)胞 、細(xì)胞培養(yǎng)試劑、細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒等細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)。如有更多問題可0512-62956104進(jìn)行咨詢。



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