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AflII內(nèi)切酶-快切酶-EG24520S

產(chǎn)品貨號： EG24520S

產(chǎn)品規(guī)格： 100 rxns

同裂酶： BspTI, BfrI, BstAFI, MspCI, Vha464I

識別位點： CTTAAG5'...C ↓ T T A A G...3'3'...G A A T T ↑ C...5'

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AflII內(nèi)切酶-快切酶

產(chǎn)品貨號： EG24520S

產(chǎn)品規(guī)格： 100 rxns

試劑價格：￥240

同裂酶： BspTI, BfrI, BstAFI, MspCI, Vha464I

識別位點： CTTAAG5'...C ↓ T T A A G...3'3'...G A A T T ↑ C...5'

LightNing? AflII內(nèi)切酶是一系列經(jīng)過基因工程重組的快速限制性內(nèi)切酶，適用于質(zhì)粒 DNA、PCR 產(chǎn)物或基因組 DNA 等的快速酶切。所有 LightNing? 快速內(nèi)切酶在通用的 CutOne? 或 CutOne? Color Buffer 中都具有優(yōu)良的活性，能夠在 5~15 分鐘內(nèi)完成酶切。

詳情介紹

LightNing? AflII內(nèi)切酶組成

組分	規(guī)格
LightNing? AflII	100 μl
10× CutOne? Buffer	1 ml
10× CutOne? Color Buffer	1 ml

特性和用法：

LightNing? AflII內(nèi)切酶，可在5~15 min內(nèi)完成反應(yīng)。

建議反應(yīng)條件：

1× CutOne? 緩沖液；

37℃溫育；參照“DNA 快速酶切流程"配制反應(yīng)體系。

失活條件：80℃溫育20 min 。

存儲條件：-20℃

分子生物學(xué)實驗過程中可能遇到的常見問題及解決方案。

問題一：酶切反應(yīng)時間過長

問題描述：在進行 DNA 酶切實驗時，使用的傳統(tǒng)內(nèi)切酶往往需要較長的反應(yīng)時間，這不僅增加了實驗的整體時長，還可能因為長時間的等待而影響實驗進度。
解決方案：LightNing? AflII 內(nèi)切酶能夠在 5 - 15 分鐘內(nèi)完成酶切反應(yīng)，大大縮短了酶切時間。相比傳統(tǒng)內(nèi)切酶，它可以顯著提高實驗效率，讓實驗者能夠更快地得到酶切結(jié)果，從而加快整個實驗進程。

問題二：緩沖液選擇困難

問題描述：不同的內(nèi)切酶可能需要不同的緩沖液，這使得在實驗中選擇合適的緩沖液變得復(fù)雜。如果選擇不當(dāng)，可能會影響酶切效果，甚至導(dǎo)致實驗失敗。
解決方案：LightNing? AflII 內(nèi)切酶在通用的 CutOne? 或 CutOne? Color Buffer 中都具有優(yōu)良的活性。這意味著實驗者無需為該內(nèi)切酶專門尋找特定的緩沖液，減少了緩沖液選擇的困擾，提高了實驗的便利性和可操作性。

問題三：酶切反應(yīng)條件難以控制

問題描述：準(zhǔn)確控制酶切反應(yīng)條件對于獲得良好的酶切效果至關(guān)重要。然而，不同的內(nèi)切酶可能需要不同的溫度、緩沖液濃度等條件，這使得實驗者在設(shè)置反應(yīng)條件時需要格外小心，稍有不慎就可能導(dǎo)致實驗失敗。
解決方案：LightNing? AflII 內(nèi)切酶的建議反應(yīng)條件明確，在 1× CutOne? 緩沖液中，37℃溫育，并且參照 “DNA 快速酶切流程” 配制反應(yīng)體系。這樣清晰的反應(yīng)條件使得實驗者能夠更容易地控制實驗過程，提高實驗的成功率。

問題四：內(nèi)切酶失活不徹底

問題描述：在實驗過程中，內(nèi)切酶的失活不徹底可能會導(dǎo)致后續(xù)實驗受到干擾。例如，在進行連接反應(yīng)時，如果內(nèi)切酶沒有完全失活，可能會繼續(xù)切割連接后的 DNA，從而影響實驗結(jié)果。
解決方案：LightNing? AflII 內(nèi)切酶可以通過 80℃溫育 20 分鐘來實現(xiàn)失活。這種明確的失活條件可以確保內(nèi)切酶在實驗結(jié)束后能夠被徹底失活，避免對后續(xù)實驗產(chǎn)生不良影響。

問題五：酶切效果不穩(wěn)定

問題描述：有些內(nèi)切酶在不同的實驗條件下可能會表現(xiàn)出不穩(wěn)定的酶切效果，這使得實驗結(jié)果難以重復(fù)。實驗者可能需要花費大量的時間和精力來優(yōu)化實驗條件，以獲得穩(wěn)定的酶切效果。
解決方案：LightNing? AflII 內(nèi)切酶在通用的緩沖液中具有優(yōu)良的活性，并且反應(yīng)時間短、失活條件明確，這些特點有助于提高酶切效果的穩(wěn)定性。實驗者可以更容易地掌握該內(nèi)切酶的使用方法，從而獲得更可靠的實驗結(jié)果。

問題六：存儲條件苛刻

問題描述：一些內(nèi)切酶可能需要特殊的存儲條件，如低溫、特定的緩沖液等。這不僅增加了存儲成本，還可能在存儲過程中出現(xiàn)問題，影響內(nèi)切酶的活性。
解決方案：LightNing? AflII 內(nèi)切酶的存儲條件為 -20℃，相對較為簡單。實驗者可以更容易地滿足該內(nèi)切酶的存儲要求，確保內(nèi)切酶在存儲過程中保持良好的活性。

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