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骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基誘導(dǎo)作用下，會逐漸分化成前成脂細(xì)胞和脂肪細(xì)胞，將形成大小不一的脂滴。油紅O在脂肪中的溶解度大于其在染液中的溶解度，從而使脂肪著色呈現(xiàn)紅色或橘紅色。產(chǎn)品適用于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)，能提高誘導(dǎo)效率。

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0512-62956104

英文名稱：Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Kit

貨號：BMRS-D101

規(guī)格：200 mL/Kit

質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn) pH：7.2~7.4

內(nèi)毒素含量：＜10 EU/mL

生物安全：細(xì)菌、真菌、支原體檢測陰性

質(zhì)量檢測：誘導(dǎo)測試合格

產(chǎn)品組分

規(guī)格

HyCyteTM 兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化試劑盒

Rabbit Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Adipogenic Differentiation Kit

貨號：BMRB-D102

規(guī)格：400 mL/Kit

成分2

兔骨髓干細(xì)胞

| 使用說明

1. 成脂誘導(dǎo)分化操作

1.1 接種干細(xì)胞取對數(shù)生長期的細(xì)胞，按照 2.0×10e4 cells/cm2 的細(xì)胞密度接種至培養(yǎng)器皿，于 37℃， 5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)至匯合度 90~100%，棄掉上清，加入成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基誘導(dǎo)液。

NOTE：如細(xì)胞貼壁性較差，建議使用 0.1%明膠對培養(yǎng)底面進(jìn)行包被。

1.2 細(xì)胞分化誘導(dǎo) 于 37℃，5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)約 3 天，更換為成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基維持液，培養(yǎng) 1 天后，再更換為成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基誘導(dǎo)液，繼續(xù)培養(yǎng) 3 天。按照以上換液頻率誘導(dǎo) 14~21 天，并注意觀察細(xì)胞形態(tài)變化。根據(jù)細(xì)胞誘導(dǎo)形成的脂滴數(shù)量和大小，決定終止細(xì)胞誘導(dǎo)的時間，并進(jìn)行染色鑒定。

2. 染色鑒定

2.1 細(xì)胞固定吸去培養(yǎng)基使用適量 1×PBS 清洗一次，棄去后取適量 4%中性甲醛溶液覆蓋培養(yǎng)器皿底面，室溫固定 30~60 min，棄去固定液再使用 1×PBS 清洗兩次。

2.2 油紅 O 染色取生理鹽水或1×PBS與油紅O原液配制油紅 O工作液（油紅O原液: 生理鹽水=3:2），現(xiàn)用現(xiàn) 配。配制后可對油紅O工作液進(jìn)行離心，以沉淀染色液中的過飽和析出物。向清洗干凈的誘導(dǎo)孔內(nèi)加入適量油紅O工作液，靜置染色30min。吸走油紅O工作液，用1×PBS清洗兩次，并加入適量1 ×PBS避免細(xì)胞干燥。

2.3 誘導(dǎo)評估顯微鏡下觀察成脂染色效果，并進(jìn)行圖像采集和誘導(dǎo)評估。誘導(dǎo)成功時，脂滴與油紅 O 染料結(jié)合后呈現(xiàn)紅色或橘紅色。 NOTE: 干細(xì)胞的成脂分化水平因細(xì)胞類型、細(xì)胞供體來源，培養(yǎng)條件、細(xì)胞代次、細(xì)胞狀態(tài)和分化時間等因素而異。

成骨干細(xì)胞誘導(dǎo)分化

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