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蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司

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  • 培養(yǎng)基
StemScale PSC 懸浮培養(yǎng)基

開啟PSC培養(yǎng)的新維度Gibco StemScale? PSC懸浮培養(yǎng)基是一種可擴展、易于使用的培養(yǎng)基,支持在懸浮培養(yǎng)中大規(guī)模生成人多能干細胞(PSC)。

1.擴增能力—每次傳代可實現5-10倍擴增

2.細胞擴增能力超出其他市售PSC懸浮培養(yǎng)基系統(tǒng)3倍以上 

3.簡化的工作流程—提供簡單的培養(yǎng)基更換方案,

4.無需在培養(yǎng)或傳代過程中使用微載體或細胞濾網

 5.多種形式的可擴展性—支持將PSC培養(yǎng)

6.規(guī)模擴大至多種容器形式:多孔板、搖瓶和生物反應器

7.PSC細胞系間的一致性—在保持多能性和細胞活力的同時實現可靠且一致的球狀體形成

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● 產品介紹/ product introductio

StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基

產品信息

干細胞培養(yǎng)

Gibco StemScale? PSC懸浮培養(yǎng)基是一種可擴展、易于使用的培養(yǎng)基,支持在懸浮培養(yǎng)中大規(guī)模生成人多能干細胞(PSC)。該款培養(yǎng)基經過專門配制,可解決當前PSC球 狀體培養(yǎng)系統(tǒng)在聚集方面的技術挑戰(zhàn)。

● 產品特點characteristics

圖片3擴增能力強 —每次傳代可實現5-10倍擴增,細胞擴增能力超出其他市售PSC懸浮培養(yǎng)基系統(tǒng)3倍以上
 

圖片3簡化的工作流程—提供簡單的培養(yǎng)基更換方案,無需在培養(yǎng)或傳代過程中使用微載體或細胞濾網
圖片3多種形式的可擴展性—支持將PSC培養(yǎng)規(guī)模擴大至多種容器形式:多孔板、搖瓶和生物反應器

圖片3PSC細胞系間的一致性—在保持多能性和細胞活力的同時實現可靠且一致的球狀體形成

● 實驗效果result

擴增能力強

Gibco StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基通過球狀體的自聚集進而支持懸浮多能干細胞的生長,非常適合需要大量高質量PSC的應用。

StemScale培養(yǎng)基每次傳代可實現5-10倍擴增,細胞擴增能力超出其他培養(yǎng)基3倍(圖1)。

Scaling expansion using StemScale Medium

圖1.使用StemScale培養(yǎng)基進行大規(guī)模擴增。在30次傳代和20周培養(yǎng)中,StemScale培養(yǎng)基每次傳代均可實現10倍以上的細胞擴增(左圖)。與其他供應商的培養(yǎng)基“M”相比,StemScale培養(yǎng)基可在同一時間段內實現高達3倍的擴增(右圖)。

StemScale medium helps to maintain cell viability and pluripotency

圖2.StemScale培養(yǎng)基有助于維持細胞活性和多能性。與其他懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)相比,StemScale培養(yǎng)基可在傳代3次后提供優(yōu)越的細胞活性,并且在傳代30次后仍可維持高多能性。

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在更短時間內生成更多細胞

與貼壁培養(yǎng)相比,在StemScale懸浮培養(yǎng)基中培養(yǎng)PSC球狀體允許用戶在更短的時間內培養(yǎng)更多數量的細胞(表1),同時減少培養(yǎng)基和塑料耗材的消耗量。

從6孔板的單個孔開始,相比貼壁培養(yǎng),在懸浮培養(yǎng)中生長的細胞在時間和細胞數量方面顯示出明顯差異。

  懸浮大規(guī)模培養(yǎng) 貼壁大規(guī)模培養(yǎng)
總培養(yǎng)天數 培養(yǎng)容器形式 平均細胞產量 培養(yǎng)基消耗量 培養(yǎng)容器形式 平均細胞產量* 培養(yǎng)基消耗量
3天 6孔板(單孔) 1.5 x 106 個細胞 6 mL 6孔板(單孔) 1.5 x 106 個細胞 6 mL
7天 6孔板(全板) 18 x 106 個細胞 30 mL 100 mm 培養(yǎng)皿 9 x 106 個細胞 48 mL
11天 100 mL 生物反應器 150 x 106 個細胞 200 mL 150 mm 培養(yǎng)皿 22 x 106 個細胞 72 mL
15天 500 mL 生物反應器 750 x 106 個細胞 1,000 mL 經處理的Nunc TripleFlask細胞培養(yǎng)瓶 78 x 106 個細胞 800 mL
19天 3 L 生物反應器 4.5 x 109 個細胞 6,000 mL 2層Nunc Cell Factory系統(tǒng) 300 x 106 個細胞 1,200 mL
23天 10層Nunc Cell Factory系統(tǒng) 1.5 x 109 個細胞 6,000 mL
27天 30層Nunc Cell Factory系統(tǒng) 4.5 x 109 個細胞 18,000 mL
*該值根據每種培養(yǎng)容器形式的4天擴增數據估計得出。3 L生物反應器和30層Thermo Scientific Nunc Cell Factory系統(tǒng)的值根據表中列出的較小生物反應器和Nunc Cell Factory系統(tǒng)形式推斷得出。


表1.懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)與貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)的大規(guī)模培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)(使用StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基)與貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)的大規(guī)模培養(yǎng)。

Pluripotent stem cells grown in StemScale PSC Suspension medium

圖3.在StemScale培養(yǎng)基中生長的多能干細胞。在StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基中接種的多能干細胞可在5天內維持最佳球狀體大小和活性。

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“StemScale培養(yǎng)基能夠改善干細胞球狀體形成的效率?!?/b>
—— S. Rieck,ViaCyte

簡化的工作流程


使用StemScale培養(yǎng)基可輕松使貼壁培養(yǎng)適應到懸浮培養(yǎng)。StemScale培養(yǎng)基允許用戶采用隔日換液的時間方案(如需要)。在StemScale培養(yǎng)基中開始培養(yǎng)后,通過更換50%的培養(yǎng)基以定期每天或隔天一次飼養(yǎng)Gibco游離型iPSC。

Chart showing similar fold PSC expansion in StemScale medium with every day and every other day feeding.
Chart shows high percent pluripotency marker expression with flexible feeding in StemScale medium
 

圖5.隔日飼養(yǎng)的培養(yǎng)物在倍數變化(A)和多能性(B)方面與每日飼養(yǎng)的培養(yǎng)物相似。














跨細胞系和不同培養(yǎng)容器形式的擴增能力

對于在StemScale培養(yǎng)基中培養(yǎng)的4種不同的PSC系,每次傳代均可實現6-11倍擴增,且在15天內可擴增18-28倍。

Scale-up in suspension culture systems using StemScale PSC Suspension Medium vs. scale-up in adherent culture systems

圖6.懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)與貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)。懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)(使用StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基)與貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)的大規(guī)模培養(yǎng)。

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PSC球狀體的神經和心臟分化

從StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基培養(yǎng)的PSC球狀體直接開始神經誘導

Neural induction of spheroids

圖7.球狀體的神經誘導。使用PSC神經誘導培養(yǎng)基(貨號A1647801),直接從StemScale培養(yǎng)基培養(yǎng)的PSC球狀體中誘導大量成熟的神經干細胞。

將StemScale培養(yǎng)的球狀體引入DA神經元分化工作流程

Dopaminergic neurons are directly initated from PSC spheroids cultured in StemScale medium

圖8.直接從StemScale培養(yǎng)基培養(yǎng)的PSC球狀體中誘導多巴胺能神經元。與35天的貼壁培養(yǎng)方案相比,在懸浮培養(yǎng)25天時使用PSC多巴胺能神經元(DA)分化試劑盒(貨號A3147701)從StemScale培養(yǎng)基中分化的DA神經元共表達的FOXA2/Otx2數量相同(數據未顯示)。

PSC球狀體的心臟類器官分化

Cardiomycytes differentiated in suspension from PSC spheroids grown in StemScale medium

圖9.在StemScale培養(yǎng)基中生長的懸浮PSC球狀體分化為心肌細胞。(A)誘導形成心臟前,在StemScale培養(yǎng)基中生長的未分化的hPSC球體形態(tài)。(B)心臟誘導開始12天的球狀體。(C)用心臟標記物α橫紋肌肌動蛋白(綠色)和心肌肌鈣蛋白T(紅色)染色心臟類器官。細胞核用DAPI(藍色)復染。


● 規(guī)格參數  / SPECIFICATION 

貨號 產品名稱 規(guī)格 單價 (CNY)
A4965001 StemScale? PSC Suspension Medium 1 L 8340
其他推薦的試劑、耗材和設備
貨號 產品名稱 規(guī)格 單價 (CNY)
A18945 人附著體誘導多能干細胞系 1 x 106 cells?vial 17542
A1110501 StemPro? Accutase? 細胞解離試劑 100 mL 796
A1647801 PSC 神經誘導培養(yǎng)基 500 mL 7478
A3147701 PSC Dopaminergic Neuron Differentiation Kit 1 kit 38412
A2921201 PSC 心肌細胞分化試劑盒 1 kit 8038
A3695201 B-27? Supplement, XenoFree, minus insulin 10 mL 3431
150239 Nunc? 未經表面處理的多孔細胞培養(yǎng)板 Case of 75 1731
4115-0125 125mL Erlynmeyer (Shaker) Flask, Single-Use PETG, Plain Bottom, Filter Cap, Pack of 1 Case of 24 1936


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