圖1.使用StemScale培養(yǎng)基進行大規(guī)模擴增。在30次傳代和20周培養(yǎng)中,StemScale培養(yǎng)基每次傳代均可實現10倍以上的細胞擴增(左圖)。與其他供應商的培養(yǎng)基“M”相比,StemScale培養(yǎng)基可在同一時間段內實現高達3倍的擴增(右圖)。
開啟PSC培養(yǎng)的新維度Gibco StemScale? PSC懸浮培養(yǎng)基是一種可擴展、易于使用的培養(yǎng)基,支持在懸浮培養(yǎng)中大規(guī)模生成人多能干細胞(PSC)。
1.擴增能力—每次傳代可實現5-10倍擴增
2.細胞擴增能力超出其他市售PSC懸浮培養(yǎng)基系統(tǒng)3倍以上
3.簡化的工作流程—提供簡單的培養(yǎng)基更換方案,
4.無需在培養(yǎng)或傳代過程中使用微載體或細胞濾網
5.多種形式的可擴展性—支持將PSC培養(yǎng)
6.規(guī)模擴大至多種容器形式:多孔板、搖瓶和生物反應器
7.PSC細胞系間的一致性—在保持多能性和細胞活力的同時實現可靠且一致的球狀體形成
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StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基
Gibco StemScale? PSC懸浮培養(yǎng)基是一種可擴展、易于使用的培養(yǎng)基,支持在懸浮培養(yǎng)中大規(guī)模生成人多能干細胞(PSC)。該款培養(yǎng)基經過專門配制,可解決當前PSC球 狀體培養(yǎng)系統(tǒng)在聚集方面的技術挑戰(zhàn)。
擴增能力強
—每次傳代可實現5-10倍擴增,細胞擴增能力超出其他市售PSC懸浮培養(yǎng)基系統(tǒng)3倍以上
PSC細胞系間的一致性—在保持多能性和細胞活力的同時實現可靠且一致的球狀體形成
Gibco StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基通過球狀體的自聚集進而支持懸浮多能干細胞的生長,非常適合需要大量高質量PSC的應用。
StemScale培養(yǎng)基每次傳代可實現5-10倍擴增,細胞擴增能力超出其他培養(yǎng)基3倍(圖1)。
圖1.使用StemScale培養(yǎng)基進行大規(guī)模擴增。在30次傳代和20周培養(yǎng)中,StemScale培養(yǎng)基每次傳代均可實現10倍以上的細胞擴增(左圖)。與其他供應商的培養(yǎng)基“M”相比,StemScale培養(yǎng)基可在同一時間段內實現高達3倍的擴增(右圖)。
圖2.StemScale培養(yǎng)基有助于維持細胞活性和多能性。與其他懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)相比,StemScale培養(yǎng)基可在傳代3次后提供優(yōu)越的細胞活性,并且在傳代30次后仍可維持高多能性。
與貼壁培養(yǎng)相比,在StemScale懸浮培養(yǎng)基中培養(yǎng)PSC球狀體允許用戶在更短的時間內培養(yǎng)更多數量的細胞(表1),同時減少培養(yǎng)基和塑料耗材的消耗量。
從6孔板的單個孔開始,相比貼壁培養(yǎng),在懸浮培養(yǎng)中生長的細胞在時間和細胞數量方面顯示出明顯差異。
懸浮大規(guī)模培養(yǎng) | 貼壁大規(guī)模培養(yǎng) | |||||
總培養(yǎng)天數 | 培養(yǎng)容器形式 | 平均細胞產量 | 培養(yǎng)基消耗量 | 培養(yǎng)容器形式 | 平均細胞產量* | 培養(yǎng)基消耗量 |
---|---|---|---|---|---|---|
3天 | 6孔板(單孔) | 1.5 x 106 個細胞 | 6 mL | 6孔板(單孔) | 1.5 x 106 個細胞 | 6 mL |
7天 | 6孔板(全板) | 18 x 106 個細胞 | 30 mL | 100 mm 培養(yǎng)皿 | 9 x 106 個細胞 | 48 mL |
11天 | 100 mL 生物反應器 | 150 x 106 個細胞 | 200 mL | 150 mm 培養(yǎng)皿 | 22 x 106 個細胞 | 72 mL |
15天 | 500 mL 生物反應器 | 750 x 106 個細胞 | 1,000 mL | 經處理的Nunc TripleFlask細胞培養(yǎng)瓶 | 78 x 106 個細胞 | 800 mL |
19天 | 3 L 生物反應器 | 4.5 x 109 個細胞 | 6,000 mL | 2層Nunc Cell Factory系統(tǒng) | 300 x 106 個細胞 | 1,200 mL |
23天 | – | – | – | 10層Nunc Cell Factory系統(tǒng) | 1.5 x 109 個細胞 | 6,000 mL |
27天 | – | – | – | 30層Nunc Cell Factory系統(tǒng) | 4.5 x 109 個細胞 | 18,000 mL |
*該值根據每種培養(yǎng)容器形式的4天擴增數據估計得出。3 L生物反應器和30層Thermo Scientific Nunc Cell Factory系統(tǒng)的值根據表中列出的較小生物反應器和Nunc Cell Factory系統(tǒng)形式推斷得出。 |
表1.懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)與貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)的大規(guī)模培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)(使用StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基)與貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)的大規(guī)模培養(yǎng)。
圖3.在StemScale培養(yǎng)基中生長的多能干細胞。在StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基中接種的多能干細胞可在5天內維持最佳球狀體大小和活性。
“StemScale培養(yǎng)基能夠改善干細胞球狀體形成的效率?!?/b>
—— S. Rieck,ViaCyte
使用StemScale培養(yǎng)基可輕松使貼壁培養(yǎng)適應到懸浮培養(yǎng)。StemScale培養(yǎng)基允許用戶采用隔日換液的時間方案(如需要)。在StemScale培養(yǎng)基中開始培養(yǎng)后,通過更換50%的培養(yǎng)基以定期每天或隔天一次飼養(yǎng)Gibco游離型iPSC。
圖5.隔日飼養(yǎng)的培養(yǎng)物在倍數變化(A)和多能性(B)方面與每日飼養(yǎng)的培養(yǎng)物相似。
對于在StemScale培養(yǎng)基中培養(yǎng)的4種不同的PSC系,每次傳代均可實現6-11倍擴增,且在15天內可擴增18-28倍。
圖6.懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)與貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)。懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)(使用StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基)與貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)的大規(guī)模培養(yǎng)。
圖8.直接從StemScale培養(yǎng)基培養(yǎng)的PSC球狀體中誘導多巴胺能神經元。與35天的貼壁培養(yǎng)方案相比,在懸浮培養(yǎng)25天時使用PSC多巴胺能神經元(DA)分化試劑盒(貨號A3147701)從StemScale培養(yǎng)基中分化的DA神經元共表達的FOXA2/Otx2數量相同(數據未顯示)。
圖9.在StemScale培養(yǎng)基中生長的懸浮PSC球狀體分化為心肌細胞。(A)誘導形成心臟前,在StemScale培養(yǎng)基中生長的未分化的hPSC球體形態(tài)。(B)心臟誘導開始12天的球狀體。(C)用心臟標記物α橫紋肌肌動蛋白(綠色)和心肌肌鈣蛋白T(紅色)染色心臟類器官。細胞核用DAPI(藍色)復染。
● 規(guī)格參數 / SPECIFICATION
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